產品名稱：山羊關節軟骨細胞

細胞特性

1）來源：山羊

2）形態： 貼壁

3）含量：>1x106

4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。

細胞用途：僅供科研使用。細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的*培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。                      

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備DMEM/F12+10%FBS（推薦WinSera特級胎牛血清FBS500-WP-002）。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，*培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

HEK細胞是最早公布的Ad5-轉化的人類細胞系。HEK293細胞是人腎上皮細胞系，有多種衍生株，比如HEK293、HEK293A、HEK293T/17等都是來源于人胚胎腎細胞，其極少表達細胞外配體所需的內生受體，且比較容易轉染。HEK293 細胞系是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒(Ad5)DNA的永生化細胞，表達腺病毒5的基因。商業化的HEK 細胞均來源于1977年Graham 轉化的HEK細胞。目前， HEK293細胞系已經成為一個常用的表達目的蛋白質的細胞株。

HEK293細胞系及其衍生物廣泛用于病毒包裝的信號轉導和蛋白質相互作用研究，以及快速小規模蛋白質表達和生物制藥生產。最初的293細胞是1973年通過剪切5型腺病毒DNA轉化從一個流產的親子關系不明的人類胚胎的腎臟中獲得的。人類胚胎腎細胞起初似乎不容易轉化，經過多次嘗試，僅在分離出一個轉化克隆幾個月后，細胞就開始生長，該細胞系稱為HEK293或293細胞(ATCC編號CRL-1573)。已知有一個4kbp的腺病毒基因組片段整合在19號染色體上編碼E1A/E1B蛋白，干擾細胞周期調控途徑，抑制細胞凋亡。細胞遺傳學分析證實HEK293系為亞三倍體。對HEK293系進行了多重熒光原位雜交分析發現每個克隆中也可見多種核型，幾乎所有的細胞都存在相對于人類參考基因組的染色體改變。

山羊關節軟骨細胞

人胚腎細胞 HEK-293（293） MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁+懸浮生長

人胚腎細胞 HEK-293A DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁+懸浮生長

人高轉移鼻咽癌細胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    貼壁生長

人鼻咽癌細胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

人鼻咽癌細胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長

人卵巢癌細胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌細胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌細胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌細胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高轉移卵巢癌細胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰島素

人卵巢癌細胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

倉鼠卵巢細胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1（懸浮） CHO GROW CD2培養基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

倉鼠卵巢細胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高轉移肺癌細胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌細胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞熒光素酶標記 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌細胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌細胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞熒光素酶標記 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%（10mM）HEPES +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes+1%PS

人經典小細胞肺癌細胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 細胞漲的慢2-3周發貨

人肺癌細胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌細胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞(淋巴結轉移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大細胞肺癌細胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小細胞肺癌細胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1% PS

小鼠肺癌細胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦髓母細胞瘤細胞 D283 Med  MEM+10%FBS+1%P/S

人腦髓母細胞瘤細胞 D341 Med MEM+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+10%FBS+1%P/S  

永生化人腦微血管內皮細胞 HCMEC/D3 內皮細胞培養體系（PriMed-iCell-002）

人腦膠質瘤細胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S  

人腦膠質細胞瘤細胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人腦膠質瘤 SNB-19 DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦膠質瘤 TJ905 DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤 U118MG（U-118MG） DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤 U87MG MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤+RFP U87MG+RFP MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

小鼠腦神經膠質母細胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠腦微血管內皮細胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S  

小鼠腦神經瘤細胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S

小鼠腦神經瘤細胞熒光素酶標記 neuro-2a+luc MEM+10%FBS+1%P/S

大鼠腦膠質瘤細胞 C6 F12K +2.5%FBS+15%HS（馬血清）+1%P/S

大鼠腦膠質瘤細胞綠色熒光標記 C6+LUC F12K +2.5%FBS+15%HS（馬血清）+1%P/S

大鼠腦星形膠質細胞 CTX DMEM+10%FBS+1%P/S  

大鼠腦I型星形膠質細胞 CTX-TNA2 DMEM+10%FBS+1%P/S

大鼠腦間質細胞 DI TNC1 DMEM+10%FBS+1%P/S